华泰亿康专业制造
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延伸拓展
产品详情:2.基因修饰鼠技术转基因、基因敲入、修饰动物技术已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域的重要技术,该技术从上世纪七八十年代诞生以来,已有近四十年的历史,经典技术如DNA原核显微注射、胚胎干细胞显微注射技术一直以来经久不衰,并逐渐从基础研究实验室转向商业模式,成为一项高度标准化的新兴产业。一、技术介绍与研究进展;转基因、基因敲入修饰动物技术已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的重要技术,该技术从上世纪七八十年代诞生以来,至今已有近四十年的历史,经典技术如DNA原核显微注射、胚胎干细胞显微注射技术一直以来经久不衰,在基因修饰鼠模型构建方面日趋完善,并且如同剪切酶和抗体等常规分子生物学试剂的制备技术一样,逐渐从基础研究实验室转向商业模式,成为一项高度标准化的新兴产业,催生了数以百计的创新药物。尽管如此,传统技术仍然存在一些难以克服的缺陷,如步骤繁琐、周期漫长、成功率低、费用高昂等,而ZFN和TALEN技术的出现,或有可能将这一局面彻底改变。二、同源重组技术原理;基因修饰鼠技术是上世纪80年代中后期基于DNA同源重组的原理发展起来的,CapecchiSmithies在1987年根据同源重组(homologousrecombination)的原理,首次实现了ES外源基因的定点整合(targetedintegration),这一技术称为";基因打靶";(genetargeting)或";基因敲除";(geneknockout),利用这种ES的显微注射就可以制作出基因修饰鼠(KOMice:knockoutmice);由于这一工作,Capecchi和Smithies于2007年与Evans分享了诺贝尔医学奖。在基因修饰鼠制作过程中,需要针对目的基因两端特异性片段设计带有相同片段的重组载体,将重组载体导入到胚胎干细胞后外源的重组载体与胚胎干细胞中相同的片段会发生同源重组,根据研究项目具体情况和要求把目的基因和与细胞内靶基因特异片段同源的DNA片段都重组到带有标记基因(如neo基因,TK基因等)的载体上,成为重组的Knockout载体。
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